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              1. 下載文件詳細資料
                  文件名稱: 用SUPR-CM測定生物治療蛋白質樣品的聚集傾向 (化學穩定性Chemical Melting Cm)
                  公司名稱: 英國應用光物理公司上海代表處
                  下載次數: 315
                  文件詳細說明:
                 

                摘要

                ?聚集是生物制劑開發中的一個主要挑戰,可以使用等溫化學變性 進行評估。

                ?使用SUPR-CM測定不同濃度蛋白質的吉布斯自由能值。

                ?SUPR-CM的高通量能力允許快速處理樣品。

                ?在兩種不同緩沖液(磷酸鹽和醋酸鹽)中測量相同蛋白質的聚集傾向。

                ?證據顯示磷酸鹽顯著增加未折疊蛋白質聚集的傾向。

                ?與磷酸鹽樣品相比,醋酸鹽緩沖液的ΔG°值沒有統計上的顯著變化,聚集傾向減少了4倍以上


                蛋白質聚集是與蛋白質不穩定性相關的最大問題之一。[1]聚集可以發生在新生物制劑的開發、配方、制造和分銷過程中,并且可以由溫度、攪拌、冷凍/解凍和配方條件引起。[2],[3]聚集具有免疫原性,長期使用生物療法 可能會引起免疫反應和耐受性問題。為了維持治療的有效性,需要優化蛋白質結構和配方條件以防止或減輕聚集。

                除了測量構象穩定性外,等溫化學變性(ICD)還可用于確定蛋白質的聚集傾向。[4]這是通過在不同蛋白質濃度下通過ICD測量吉布斯自由能(ΔG°)來確定的。

                根據ΔG°值隨蛋白質濃度的變化,可以確定蛋白質的折疊或未折疊狀態是否可能導致聚集。ΔG°的增大表明折疊態易于聚集,而ΔG°的減小則表明未折疊態易于聚集。如果ΔG°沒有變化,則不存在分子間相互作用,不太可能發生聚集。[5]

                在本申請說明中,SUPR-CM熒光板讀取器用于確定模型蛋白溶菌酶在兩種不同緩沖溶液中的聚集傾向,以說明如何使用ICD來評估哪種緩沖條件將導致更少的聚集。


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